İmmün Kontrol Noktası İnhibitörlerine Küçük Hücreli Dışı Akciğer Kanseri Yanıt Vericilerinde Kanda Dolaşan Ekstraselüler Vesiküllerin Özellikleri

Kanser bağışıklığından kaçış mekanizmalarının giderek daha iyi anlaşılması, küçük hücreli dışı akciğer kanserinde (KHDAK) umut verici yeni immünoterapi ajanlarının geliştirilmesine ve uygulanmasına yol açmıştır. Bu alandaki ilerlemelere rağmen, bir hasta alt grubu, immünoterapötik stratejiye yanıt vermeyen veya direnç kazanamayan tümörler taşımaktadır. Bu nedenle bilim insanları, hasta seçimini ve immünoterapi yanıtının anlaşılmasını geliştirecek, tedavi rejimlerini iyileştirmeye ve kişiselleştirmeye yardımcı olacak biyobelirteçlere artan bir ihtiyaç olduğunu vurgulamışlardır. Bu bağlamda, doku ile ilgili biyobelirteçlerin elde edilmesi, ilerlemiş hastalıkta genellikle zor olmakla birlikte bu tür biyobelirteçlerin ekspresyonunun, tümör içindeki zaman ve uzayda değişkenlik sergileyerek bunların tahmin değerini sınırlandırdığı bildirilmiştir. Dolaşımdaki biyobelirteçler, in vivo olarak daha basit, pratik ve daha temsili tümör örneklemesi sunabilmektedir. Bu nedenle, kimliklerinin belirlenmesi büyük önem taşımaktadır. Hücre dışı veziküller (EV'ler), proteinleri, lipitleri ve nükleik asitleri taşıyan, hemen hemen tüm hücreler tarafından salınan, iki tabakalı zara bağlı parçacıklar olarak tanımlanmaktadır. EV'ler, hücreler arası iletişimin anahtar aracıları olarak kabul edilmekle birlikte kanser dahil olmak üzere çeşitli fizyolojik veya patolojik süreçlerde yer almaktadırlar. Tümör immün mikroçevresinin (TME) yeniden modellenmesinde ve kanser hücreleri, immün hücreler ve TME karmaşıklığına katılan diğer immün olmayan konakçı hücreler arasındaki çapraz karışmanın modüle edilmesinde çok önemli bir rol oynamaktadır. KHDAK ile ilgili olarak, son zamanlarda yapılan iki çalışmanın, EV ile ilişkili RNA yükünün, bağışıklık kontrol noktası inhibitörleri (ICI) yanıtı tahmin etmedeki değerini araştırdığı bildirilmiştir. Tersine, KHDAK immünoterapisinde dolaşımdaki EV alt popülasyonlarının ve protein yükünün öngörücü rolü hakkında çok az şey bilinmektedir. Yapılan bu çalışmada, preanalitik EV zenginleştirme prosedürleri olmadan taze periferik kan örneklerinde EV'lerin ayrılmasına izin veren polikromatik akış sitometrisini (PFC) kullanarak yakın zamanda patentli bir protokol uygulanmıştır. PFC, kan dolaşan EV'lerin immünofenotipini karakterize etmek ve proteomik çalışmalar için oldukça saf ve bozulmamış bir EV havuzu elde etmek için kullanılmıştır. İmmünofenotip ile ilgili olarak, toplam dolaşımdaki EV'lerin veya anahtar TME ile ilişkili hücresel alt gruplardan, özellikle endotelyal hücreler ve lökositlerden kaynaklananların, ilerlemiş KHDAK'de prognostik veya öngörücü bir değeri olup olmadığını araştırılmıştır. EV immünofenotipinin analizi, endotelden türetilmiş hücre dışı veziküller ile ICI'lere yanıt arasında daha önce bilinmeyen bir korelasyon tanımlamıştır. Dahası, proteomik analiz, ICI yanıt verenlerinin farklı taban çizgisi ve tedavi sırasında EV protein yükü gösterdiğini ortaya çıkarmıştır.

EV'lerinin keşif amaçlı bir proteomik analizi

Gelişmiş KHDAK'li 59 hastada kan dolaşan EV'lerin belirlenmesi ve alt tiplerinin belirlenmesi için optimize edilmiş bir akış sitometrisi yöntemi kullanılmış olmakla birlikte anti-PD-1 / PD-L1 inhibitörleri veya kemoterapi alan hastalardan kan örnekleri alınmıştır. Bir hasta alt grubunda sınıflandırılmış kan EV'lerinin keşif amaçlı bir proteomik analizi gerçekleştirilmiştir. Araştırmacılar sonuçlarının, tedaviden önce dolaşımdaki endotel kaynaklı EV'lerin düşük kan konsantrasyonunun, ICI'lerle tedavi edilen hastalarda daha uzun genel sağkalım ve daha yüksek hastalık kontrol oranı ile güçlü bir şekilde ilişkili olduğunu gösterdiğini belirtmişlerdir. İlginç bir şekilde, av tüfeği proteomikleri, anti-PD-1 tedavisine yanıt verenlerin EV'lerinin tedaviden önce belirli bir protein yüküne sahip olduğunu ortaya çıkarmıştır. Ek olarak, EV protein yükü, immünoterapi sırasında özel olarak modüle edilmiş olmakla birlikte dolaşımdaki endotelden türetilmiş hücre dışı vezikül konsantrasyonu ile immünoterapi ile ilişkili klinik sonuçlar arasında daha önce bilinmeyen bir ilişki belirlenmiştir. Ayrıca araştırmacılar KHDAK hastalarında anti-PD-1 bazlı tedavi yanıtına göre dolaşımdaki hücre dışı vezikül proteomunda farklılıklar gözlemlediklerini belirtmişlerdir. Genel olarak, bu sonuçların, KHDAK'den etkilenen hastalarda rasyonel immünoterapi yaklaşımları için yeni dolaşımdaki biyobelirteçlerin tanımlanmasına katkıda bulunabileceği bildirilmiştir.